اختراع حاضر مربوط به روشي براي خالص‌سازي و تهيه پادزهر به جهت مصارف درماني در موارد مسموميت با زهر گونه‌هاي سمي است. اين روش مي‌تواند براي تهيه پادزهر منووالان يا پلي‌والان بسته به موارد مصرف و راهبرد توليد استفاده شود. آنتي‌بادي‌هاي ضد سم موجود در پلاسما (IgG)، پس از طي مراحل كدروت‌زدايي، هضم آنزيمي، رسوب ناخالصي‌ها با استفاده از كاپريليك اسيد، كدورت‌زدايي، اولترافيلتراسيون/ ديافيلتراسيون و نانوفيلتراسيون خالص‌سازي مي‌شوند. اين اختراع، روشي كوتاه، ساده و ارزان براي توليد پادزهر است، به طوري كه محصول توليد شده داراي خلوص، ايمني و خاصيت خنثي‌كنندگي منطبق بر استانداردهاي فارماكوپه و سازمان بهداشت جهاني و براي اهداف درماني مناسب است. همچنين اين روش خالص‌سازي قابليت دارد تا محتواي ويروسي را تا حد قابل قبولي كاهش دهد. بنابراين، اختراع حاضر با بهبود فرايند توليد منجر به افزايش كيفيت، ايمني و بازدهي مي‌شود و هزينه‌هاي توليد را كاهش داده است، لذا مي‌تواند به طور قابل توجهي براي سيستم‌هاي بهداشتي جوامع در حال توسعه كمك كننده باشد.

سرم ضد مارگزیدگی علیه فراکسیون‌های توکسیک زهر مار کبری

اكثر قريب به اتقاق عقربهاي خطرناك در دنيا و ايران جزء عقربهاي خانواده بوتيده هستند. حداقل 5 نوع عقرب خطرناك از اين خانواده در ايران وجود دارد. زهر اين عقربها حاوي نوروتوكسين هاي با وزن مولكولي حدود 8 - 6 هزار دالتون مي باشد كه موجب عوارض شديد در بافت هاي هدف شده و سبب مرگ و مير در مصدومين مي شوند. علاوه بر اين توكسين ها، پروتئين هاي ديگري با وزن مولكولي بالا و در عين حال غير توكسيك در زهر عقربها وجود دارند كه با وجود عدم سميت، از ايمونوژنيسيتي بالايي برخوردارند. اين پروتئين ها سيستم ايمني حيوان را به خود مشغول نموده و به نور توكسين ها فرصتي جهت توليد پادتن نمي دهند. در توليد اين محصول توكسين هاي زهر 5 نوع عقرب از خانواده بوتيده، با استفاده از ستون كروماتوگرافي انباشته شده از ژل سفادكس G-50 جداسازي گرديده، كه از 7 فراكسيون حاصل، فراكسيون هاي F4,F3 اثر توكسيسيتي از خود نشان دادند. با حذف پروتئين هاي درشت و غيرتوكسيك و تزريق فراكسيونهاي توكسيك به حيوانات سرم دهنده ، ايمنوگلوبولين هاي اختصاصي عليه نورتوكسين ها تهيه شد. با اين روش سه سري سرم عليه فراكسيون هاي توكسيك تهيه شد كه تيترهاي ميانگين آنها در جدول ذيل آمده است. اثر خنثي كنندگي اين سرمها نسبت به سرم هاي عادي (شاهد) كه عليه زهر خام عقرب ها تهيه شده است (با توجه به ميانگين ميزان پروتئين هر يك از سرمها) افزايش كيفيتي برابر 84% را نشان داد. امكانات و نهاده هاي استفاده شده: اسب دستگاه الكترو شوك زهر خام عقربهاي خانواده بوتيده ايران، كيسه دياليز، ستون كروماتوگرافي ، ژل سفادكس G-50 ليوفليزاتور دستگاههاي تصفيه و تغليظ پلاسما و ...

طي سالهاي 1350 تا 1390 تنها يك نوع پادزهر پلي والان ضد مارگزيدگي (هگزا والان) براي تمام نقاط ايران ساخته مي شد. پراكندگي مارهاي سمي ايران و پيچيده و دشوار بودن فرآيند توليد ايمنوگلوبولين زهر مار كبري ، اساس طراحي توليد پادزهرهاي منطقه اي در دهه اخير بوده است . مارهاي سمي موجود در ايران ، داراي پراكندگي در همه جاي كشور نمي باشند. بطوريكه ماركبري فقط در شمال شرق ، افعي جعفري در شرق و جنوب ، افعي قفقازي و افعي زنجاني در شمال و شمال غرب ، افعي شاخدار در شرق ، جنوب و مركز و افعي گرزه تقريباً در تمام ايران يافت مي شود. در اين راستا سه نوع پادزهر ضد مارگزيدگي ( منووالان كبري، تري والان افعي گرزه ، افعي جعفري و افعي شاخدار و پنتاوالان افعي گرزه ، افعي جعفري ، افعي شاخدار ، افعي قفقازي و افعي زنجاني ) طراحي گرديد. طراحي توليد پادزهرهاي منطقه اي و متعاقب آن طرح حاضر ، با پشتوانه يك دهه كارشناسي و تحقيق روي پارامترهاي مختلفي همچون ؛ بررسي پراكندگي مارهاي اسمي ايران ، بررسي نحوهفرمولاسيون زهر ها و تهيه آنتي ژن ، بررسي ميزان تزريق زهر به هر اسب و تدوين پروتكل نهايي تزريق ، كنترل پاسخ هاي ايمني اسب ها و بررسي تهيه پادزهر منووالان كبري (به جهت استفاده در فرمولاسيون پادزهر اگزاوالان براي مناطق شمال شرق ايران )، اجراشد. به منظور توليد اين پادزهر ، زهر پنج گونه از مارهاي افعي گرزه ، افعي جعفري افعي شاخدار ، افعي قفقازي و افعي زنجاني ، استهسال و با تزريق به اسب ايمونوگلوبولين ضد زهر مار (پادزهر ) در خون اسب تشكيل مي شود . در نهايت با خونگيري از اسبها و خالص سازي پلاسماي هايپر ايمن ، پادزهر خالص حاصل مي گردد. كنترل كيفيت پادزهر از نظر تست هاي بيولوژيكي و فيزيك و شيميايي انجام ايمونوگلوبولين ضد زهر مار در آمپولهاي 10 ميلي ليتري تهيه مي گردد.